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大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1試劑盒

大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1試劑盒

簡要描述:上海恒遠(yuǎn)生物專業(yè)代理進(jìn)口“大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1試劑盒",公司一直秉承對(duì)客戶負(fù)責(zé),以高質(zhì)量,超優(yōu)惠的價(jià)格贏得廣大老師和同學(xué)們的信任與支持。

產(chǎn)品型號(hào): 大鼠MCP-1

所屬分類:大鼠酶聯(lián)免疫試劑盒

更新時(shí)間:2022-08-20

詳細(xì)說明:

大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1試劑盒  大鼠L-Selectin大鼠elisa試劑盒

產(chǎn)品名稱:大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1試劑盒     

各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔溢液等…
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
產(chǎn)品用途:For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù).

試劑:
(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2)  洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M   
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克   KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3) 稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
(4) 終止液(2M H2SO4):   
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。   
(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml
0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
(6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:
ABTS 0.5mg   
底物緩沖液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
(8) 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
(9) 正常人血清和陽性對(duì)照血清。

操作步驟:
用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
   ↓   
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
   ↓   
于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,   37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
   ↓
加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
     ↓
終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
     ↓
結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性    
操作步驟:
用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性 。
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司將進(jìn)一步加強(qiáng)人才經(jīng)營、產(chǎn)品經(jīng)營,不斷提升企業(yè)的核心竟?fàn)幜Γ瑢?shí)現(xiàn)具有產(chǎn)業(yè)體系、知識(shí)化創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)的化的公司,服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接世界經(jīng)濟(jì)一體化所帶來的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。
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