亚洲精品乱码久久久久久金桔影视-www国产无套内射com-日韩国产亚洲高清在线久草-亚洲日韩看片无码超清-欧美亚洲日本国产综合在线

當前位置:網站首頁技術文章 > 細胞培養技術中周期的測定

細胞培養技術中周期的測定

更新時間:2013-07-22 點擊量:2519

細胞培養技術中周期的測定
一、原理
     細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。
單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。
測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法。
BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經過兩個細胞周期后,細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應表現為一條單體淺染。如經歷了三個周期,則染色體中約一半為兩條單體均淺染,另一半為一深一淺。細胞如果僅經歷了一個周期,則兩條單體均深染。計分裂相中各期比例,就可算出細胞周期的值。
二、儀器、用品與試劑
1、儀器、用品:同常規細胞培養
2、試劑:BrdU(1.0mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液
三、操作步驟
1、細胞生長至指數期時,向培養液中加入BrdU,使zui終濃度為10μg/ml。
2、44小時加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。
3、48小時后常規消化細胞至離心管中,注意培養上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。
4、常規染色體制片(見第三部分:染色體技術)。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上,鋪上2×SSC 液,距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液,流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘,流水沖洗,晾干。
8、鏡檢100個分裂相,計*、二、三、四細胞期分裂指數。
9、計算: 細胞周期(Tc)=48/(小時)
附:(1)BrdU配制: BrdU 10mg十雙蒸水10ml   4℃下避光保存。
   (2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,檸檬酸三鈉•2H2O 0.88克,加水至100ml,4℃保存

上海恒遠產品涵蓋免疫調節蛋白、白介素、集落刺激因子、生長因子、化學趨化因子、干擾素、脂聯素、成纖維生長因子、轉化生長因子、腫瘤壞死因子、神經營養素和防御素等諸多生命科學研究領域中重要的生物活性分子。 為跟蹤當今科研發展、滿足日益增長的需求,上海恒遠研制出無動物成分的重組蛋白 。這些蛋白是利用專有的無動物成分生產設施,在嚴格的無動物成分條件下生產出來,因此痕量的動物源性污染引發潛在問題的可能性被降至zui低,從而*達到臨床前研究和細胞治療用標準。此外,上海恒遠還開發出無動物成分的培養基添加物試劑盒 。這些試劑盒經改良設計,其中的無血清組分對多種哺乳動物細胞的生長有更好的維持能力。

主站蜘蛛池模板: 国产人妻精品一区二区三区不卡| 97色偷偷色噜噜狠狠爱网站| 欧美精品一区二区黄a片| 国产精品爽爽ⅴa在线观看| 成年黄页网站大全免费无码| 久久久无码精品一区二区三区蜜桃| 337p日本欧洲亚洲高清鲁鲁| 国产精品av一区二区三区不卡蜜| 国产激情电影综合在线看| 波多野结衣高清一区二区三区| 精品欧美一区二区在线观看| 免费无码十八禁污污网站| 亚洲精品伦理熟女国产一区二区 | 久久综合九色欧美综合狠狠| 中文字幕一本久久综合| 精品国产免费人成网站| 人妻系列无码专区喂奶| 国产精品区一区二区三在线播放| 四虎永久在线精品免费播放| 欧洲熟妇性色黄| 亚洲最大中文字幕无码网站| 最新永久无码av网址亚洲 | av明星换脸无码精品区| 青青草国产精品人人爱| 麻豆国产人妻欲求不满| 久久精品国产亚洲a片高清不卡| 日本污ww视频网站| 尤物tv国产精品看片在线| 人体内射精一区二区三区| 精品玖玖玖视频在线观看| 精品国偷自产在线视频九色| 午夜激情视频| 国产精品久久久久久无码五月| 97超级碰碰碰久久久久| 国产综合有码无码中文字幕 | 影音先锋女人aa鲁色资源| 在线日韩日本国产亚洲| 直接观看黄网站免费视频| 成 人 色综合 综合网站| 国产精品aⅴ免费视频| 亚洲成av人不卡无码影片|