大鼠胰島素試劑盒詳細(xì)操作步驟

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫，試劑不能直接在37 溶解；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加標(biāo)準(zhǔn)品：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，ELISA試劑盒 依次加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50ul（建議每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔）人ELISA試劑盒。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。大鼠ELISA試劑盒在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl，然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻小鼠ELISA試劑盒。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘ELISA試劑盒。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，大鼠ELISA試劑盒每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干小鼠ELISA試劑盒。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外ELISA試劑盒。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘人ELISA試劑盒.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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