亚洲精品乱码久久久久久金桔影视-www国产无套内射com-日韩国产亚洲高清在线久草-亚洲日韩看片无码超清-欧美亚洲日本国产综合在线

當前位置:網站首頁技術文章 > 細胞凋亡晚期檢測技術

細胞凋亡晚期檢測技術

更新時間:2021-01-19 點擊量:1153

     晚期檢測:

    細胞凋亡晚期中,核酸內切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產生大量長度在180-200 bp 。對于這一現象的檢測通常有以下兩種方法:
 
    1.TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling)
 
    通過DNA末端轉移酶將帶標記的 dNTP (多為dUTP)間接或直接接到3’-OH端,再通過酶聯顯色或熒光檢測定量分析結果。美國Intergen公司提供多種標記方法,直接熒光標記,介導熒光標記或過氧化物酶聯顯色,可做細胞懸液、福爾馬林固定或石蠟處理的組織、細胞培養物等多種樣本的檢測。其中,直接標記步驟少,操作簡便。而間接標記有信號放大的作用,檢測靈敏度高。
 
    2.LM-PCR Ladder (連接介導的PCR檢測)
 
    當凋亡細胞比例較小以及檢測樣品量很少(如活體組織切片)時,直接瓊脂糖電泳可能觀察不到核DNA的變化。CLONTECH公司的ApoAlert?LM-PCR Ladder Assay Kit通過LM-PCR(ligation-mediated PCR),連上特異性接頭,專一性地擴增核小體的梯度片段,從而靈敏地檢測凋亡時產生的核小體的梯度片段。此外,LM-PCR 檢測是半定量的,因此相同凋亡程度的不同樣品可進行比較。
 
    上述兩種方法都針對細胞凋亡晚期核DNA斷裂這一特征,但細胞受到其它損傷(如機械損傷,紫外線等)也會產生這一現象,因此它對細胞凋亡的檢測會受到其它原因的干擾。
 
    3.emerase Detection (端粒酶檢測)
 
    這是相對來說推出較早,用得較多的一種方法。端粒酶是由RNA和蛋白組成的核蛋白,它可以自身RNA為模板逆轉錄合成端粒區重復序列,使細胞獲得“永生化"。正常體細胞是沒有端粒酶活性的,每分裂一次,染色體的端粒會縮短,這可能作為有絲分裂的一種時鐘,表明細胞年齡、復制衰老或細胞凋亡的信號。研究發現,90%以上的癌細胞或凋亡細胞都具有端粒酶的活性。Intergen公司的TRAP-eze emerase Detection Kit在1996年推出。它提供特定的寡核苷酸底物,分別與底物及端粒重復序列配對的引物。如果待測樣本中含有端粒酶活性,就能在底物上接上不同個數的6堿基(GGTTAG)端粒重復序列,通過PCR反應,產物電泳檢測就可觀察到相差六個堿基的DNA Ladder現象(參見圖4)。此外,Intergen公司還提供用酶聯免疫法(ELISA)檢測的試劑盒.
 
    同樣,這種檢測方法也不專對細胞凋亡,檢測結果也不純反應細胞凋亡的發生。
主站蜘蛛池模板: 中文一国产一无码一日韩| 亚洲欲色欲香天天综合网| 丁香五月激情综合亚洲| 午夜无码福利伦利理免| 欧美日产国产新一区| 久久婷婷五月综合97色直播| 亚洲欧美中文字幕5发布 | 欧妇女乱妇女乱视频| 国产精品香蕉在线观看 | 88国产精品视频一区二区三区| 亚洲欧美尹人综合网站 | 香蕉久久久久久av综合网成人| 人禽交 欧美 网站| av人摸人人人澡人人超碰手机版| 日本japanese漂亮丰满| 亚洲婷婷六月的婷婷| 成年女人免费v片| 久久国产精品久久久久久| 97在线视频人妻无码| 无码人妻av一区二区三区蜜臀 | 男女啪啪免费观看无遮挡| 深爱婷婷国产在线精品av| 久久亚洲精品无码观看| 亚洲精品一区二区三区中文字幕 | 久久精品亚洲男人的天堂| 日本疯狂爆乳xxxx| 婷婷国产天堂久久综合亚洲| 午夜在线视频| 天天做天天爱天天综合网| 人妻av无码系列一区二区三区| 激情综合亚洲色婷婷五月app| 久久zyz资源站无码中文动漫| 亚洲成av人片无码不卡| 中文字幕av伊人av无码av狼人| 久久天天躁夜夜躁狠狠躁| 国产乱人伦av在线a更新| 少妇仑乱a毛片无码| 久久精品国产99久久无毒不卡| 男人的天堂aⅴ在线| 另类老妇奶性BBWBBw| 亚洲の无码国产の无码步美 |